AV鲁丝一区鲁丝二区鲁丝三区,亚洲欧洲无码AV电影在线观看,99久久久国产精品免费蜜臀,无码日韩精品一区二区人妻

您好!歡迎訪問杭州柏恒科技有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

15268510695

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞凍存盒的實驗步驟,您都知道嗎?

細(xì)胞凍存盒的實驗步驟,您都知道嗎?

更新時間:2021-12-01      點擊次數(shù):3200
  什么是細(xì)胞凍存?
  細(xì)胞長勢良好,供大于求時,就可以考慮把細(xì)胞凍存起來,以后再用。當(dāng)溫度低于-70℃時,細(xì)胞內(nèi)的酶活性全部停止,代謝活動停止,故可以達(dá)到長期保存的目的。隨著溫度降低,細(xì)胞內(nèi)外的水分都會結(jié)晶,所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞,從而引起細(xì)胞死亡,特別是-20-0℃的階段,冰晶呈針狀,及容易引發(fā)細(xì)胞損傷。
  細(xì)胞凍存盒的基本原則是緩慢冷凍,實驗證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。
  細(xì)胞凍存盒的實驗步驟:
  1.配制含10%DMSO、20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液4mL。
  2.取出生長良好的細(xì)胞。
  3.吸除舊的培養(yǎng)液:拿出吸管(要拿吸管的上端),插入與抽濾瓶相連的橡膠管中,在酒精燈外焰灼燒滅菌,細(xì)胞培養(yǎng)瓶傾斜將吸管插入瓶底部一角,吸出舊的培養(yǎng)液,將用后的吸管棄于廢棄缸里。
  4.消化:拿出5mL移液管,插入電槍中,酒精燈過火灼燒,吸取2mL0.25%胰酶,混勻,放于37℃孵箱中消化5-6min。取下用后的移液管。
  5.中和:從孵箱中拿出培養(yǎng)瓶,顯微鏡下觀察細(xì)胞是否被*消化下來,5mL滅菌后移液管加入3mL培養(yǎng)液終止消化。
  6.離心收集細(xì)胞:配平后離心200×g,3min。將新培養(yǎng)液加入新培養(yǎng)瓶中,2mL/瓶(培養(yǎng)瓶底面積為25cm2)。
  7.分裝凍存:將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1mL。
  8.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;
  9.凍存:細(xì)胞凍存盒,里面有異丙醇,直接放入-80過夜,凍存盒自動緩慢降溫。然后-196℃液氮保存。
杭州柏恒科技有限公司
地址:浙江省杭州市富陽區(qū)春江街道緯山路588號1號樓2-3層
郵箱:marketing@bio-gener.com
傳真:0571-88037572
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號
了解更多信息
丰满女老板bd高清a片| 噜噜狠狠色综合久色a站网址| 黑鬼大战白妞高潮喷白浆| old欧美老妇videos| 97午夜理论片在线影院| 国产精品高潮呻吟久久AV无码| 邻居一晚让我高潮3次正常吗| japanesexxx护士老师| 新婚之夜玩弄人妻系列| 春药play揉屁股play男男| 久久精品国产99久久无毒不卡| 久久久久久久97| 甜性涩爱在线播放| 日韩人妻无码专区精品| 高h乱好爽要尿了潮喷h漫画| 亚洲 欧洲 日产 经典| 在线二区 中文 无码| 国产精品毛片一区二区| 亚洲性爱视频| 色五月丁香六月欧美综合| 日韩性做爰免费a片aa片| 亚洲国产AV无码专区亚洲AVL| 欧美另类vivox21老少配| 视频免费网站入口| 一本大道精品成人免费视频| 狠狠在啪线香蕉777视频| 国产精品成人无码久久久| 欧美日韩在线播放二区| 欧洲无码一区二区三区在线观看| 国产午夜福利精品一区二区三区| 强开少妇嫩苞又嫩又紧小说| 风流老熟女一区二区三区| 色综合久久久无码中文字幕波多| 含着jing液去上课h| 美女扒开尿口让男人桶| 久久精品人妻少妇一区二区三区| 久久久久久A亚洲欧洲AV| 亚洲性爱视频| 朝鲜女人毛多水多又紧又滑| 国产真人无码作爱视频免费| 国产成人免费AV片在线观看|